A trăit pe timpul împăratului Constantin cel Mare și a fost episcop al cetății Samosata ce aparținea Patriarhiei de Antiohia, într-o perioadă în care Biserica era tulburată de Aerezia lui Arie. Intre anii 360-361, Sf. Eusebie a stat în scaunul patriarhal din Antiohia. Potrivit tradiției, mergea prin cetățile din Siria, Finicia și Palestina, hirotonind preoți și episcopi ortodocși, când multe din scaunele episcopale erau ocupate de ierarhi arieni. în timpul împăratului Valens (364-378), Sf. Eusebie, a fost exilat în Tracia. După moartea lui Valens, întorcându-se din exil a fost lovit pe stradă cu o cărămidă în cap de o femeie eretică, lovitură ce avea să-i fie fatală. Se spune că înainte de a-și da duhul, s-a rugat pentru iertarea celora care l-au lovit.
